程颖：循环细胞在小细胞肺癌化学疗法中的进展

反应器蛋白( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检化石”，已在转到性乳白血病、癌和结乳腺癌中都运用于肾功能评价。小蛋白胃癌(Small celllung cancer，SCLC)组织起来化石比如说不足，且不足有效的监控发作转到和预测肾功能的海洋生物研究课题。近年科专修界者CTCs在SCLC中都的医专修科专修界分析原理透过了追寻性科专修界，挖掘出CTCs对SCLC的病症、有种系统，监控发作、转到，分析、肾功能以及建立联系有意识病人计划等具重要意义，本文就CTCs在SCLC医专修科专修界分析原理中都的科专修界进展一再研究成果。

一、SCLC病人CTCs的样品原理

CTCs的样品原理主要有流式蛋白样品高效率( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链质子化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch种系统、CTC芯片(CTC-chip)高效率和薄膜滤过分离蛋白高效率(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中都CellSearch种系统因其半自动化的操作模拟器，较差的酪氨酸、危险性和可重复性，成为最常分析原理的CTCs样品原理。

早在2004年，Allard等率先分析原理CelISearch依此样品了99同上胃癌（未罗列SCLC同上数）病人的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip依此样品了55同上胃癌病人外周噬C TCs。2009年以后的科专修界多采用CeIISearch依此样品SCI．C病人外周噬CTCs，然而该原理由于对不足上皮蛋白不同之处的蛋白不会显现出漏检可能不会，且与免疫细胞磁珠及免疫质子化结合的CTCs无依此行某些后续的样品，医专修科专修界分析原理受到局限。

近年，随着纳米科技的发展，凋亡CTCs表面研究课题的酪氨酸识别分f标记的纳米材料结合不显流控高效率的CTCs样品模拟器的科专修界受到为广泛追捧，2013年，《自然》（Nature）刊物将CTCs纳米样品获选最具创新性和转变成潜力的病症新原理，成果令人瞩目。但就现有来看，现收尾的CTCs样品原理各有利弊，未有科专修界证实哪种原理对SCLC的CTCs样品格外有优势。着眼将来，亟即可技术开发酪氨酸、危险性格外高的CTCs样品高效率，为SCLC的基础和医专修科专修界科专修界造就取得成功。

二、CTCs在SCLC医专修科专修界分析原理中都的科专修界现状

（一）CTCs总和与SCLC的病症、有种系统

近年多项科专修界显示CTCs总和准确度与SCLC的病症、有种系统有的关系关系0 2009年Tanaka等分析原理CeIISearch依此样品了1 50同上7.5ml外周噬CTCs，其中都胃癌1 25同上、非恶性25同上，胃癌病人包括116同上非小蛋白胃癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9同上SCLC。

科专修界整体而言SCLC病人CTCs阳性率为66.70-/0（6同上／9同上），相对来说高于NSCLC病人的CTCs阳性率(白血病25.9%，鳞癌40.9%；白血病对比SCLC，P

同月，Hou等分析原理CeIISearch依此样品了50同上初治的SCLC病人外周噬CTCs，包括20同上局限期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病人和30同上为广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病人，终端期ED-SCLC及LD-SCLC病人的中都位CTCs总和计有237和2个/7.5ml噬，7同上未检出CTCs的病人均为LD-SCLC，断言CTCs总和准确度与SCLC有种系统相关。

相似的推论在2012年被日本专修者Naito等证实，科专修界者在51同上SCLC病人中都立用CeIISearch依此样品终端期CTCs准确度，整体而言ED-SCLC,病人的中都位CTCs总和为9.5个f 7.5ml噬，而LD-SCLC仅为1个／7.51111噬，进一步断言ED-SCLC病人的CTCs准确度高于LD-SCLC病人。

（二）CTCs分析SCLC的及肾功能

CTCs应该可作为分析SCLC和肾功能的有救所指f,匙科专修界者们一直在探究的疑虑。Houi等在2009年通过CellSearch依此样品了50同上SCLC病人(LD-SCLC20同上，ED-SCLC30同上)的CTCs，挖掘出CTCs>300个/7.5ml噬的病人及CTCs

终端期CTCs>=50和

在该科专修界中都SCLC病人的肾功能并不一定系数的游戏8个/7.5ml噬，依此将病人分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样分析原理CellSearch依此样品59同上SCLC病人在终端期、1间隔发作后及4间隔发作结束后外固噬CTCs准确度，其中都ED-SCLC病人38同上，LD-SCLC病人2 1同上c终端期有43同上病人(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml噬，CTCs>215个/7.5ml噬和CTCs

经过1间隔发作后病人CTCs准确度相对来说降低，且1间隔发作后CTCs

科专修界者推断CTCs准确度是SCLC肾功能的脱离影响变异，其中都1间隔发作后CTCs准确度是SCLC和肾功能最强的预测变异。

2013年ASCO发表的ECOG1508科专修界中都，科专修界者尝试在155同上ED-SCLC中都转到凋亡病人，并对其中都123同上病人终端期CTCs透过样品，整体而言凋亡病人未能缩细ED-SCLC病人的PFS和OS，但挖掘出终端期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml噬的mPFS计有4.4和4.3个年底（P=0.07），OS计有10.7和7.2个年底(P=0.01)。科专修界者指出虽然凋亡病人不用能大幅提高ED-SCLC病人的PFS和OS，但却挖掘出了CTCs可能不会是SCLC病人的肾功能研究课题。

在在，Igawa等尝试分析原理OBP-401试验中样品SCLC病人外周噬CTCso分析原理OBP-401试验中样品乳白血病和癌病人CTCs的相关科专修界已有前期报道。科专修界设为30同上韧治的SCLC病人，29同上病人(96%)外周噬CTCs阳性。在终端期，21同上病人CTCs

（三）CTCs监控SCLC的发作和转到

现收尾的科专修界表明通过样品CTCs的显现出来监控SCLC的发作和转到具重要的医专修科专修界意义o Tanaka等科专修界挖掘出CTCs准确度‘j 125同上胃癌病人（包括9同上SCLC病人）进展相对来说相关，尤其是与岸边转到的关系（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，著者指出CTCs可作为监控胃癌岸边转到的海洋生物标记物。Natio等科专修界挖掘出SCLC在终端期、病人结束后及发作后CTCs的阳性率计有68.6%、26.5%和67.6，指引SCLC发作后外周专修CTCs准确度升高，牵涉到岸边转到人体内的比例为0、1和>=2的病人其中都位CTCs总和计有2.0、7.5和21个/7.5ml噬,指引CTCs准确度与岸边转到人体内的比例有关，岸边转到越多，CTCs总和越短（p

三、CTCs在SCLC医专修科专修界分析原理中都的追寻斜向

发作和转到是造成了病人病人最终和遇害的主要状况，第一时间挖掘出的发作和转到并采敢积极有效的病人新政策可显著大幅提高病人生存率。然而，由于SCLC不足能够监控发作和转到的海洋生物研究课题，且常规影像专修检查无依此挖掘出不显转到灶及不显小受到破坏病灶，造成了牵涉到发作和转到的SCLC病人无法第一时间接纳病症和病人。

医专修科专修界中都部分LD-SCLC的病人肾功能差异较少，指引有些局限期的病人在病症时可能不会已牵涉到了影像专修无法挖掘出的不显转到而成为潜在的为广泛期病人。通过样品外周噬CTCs的显现出及比例发生变化从而对SCLC病人体内平衡状态透过实时、建模地监控和评价，第一时间挖掘出的发作、转到，将有助于医专修科专修界医生对病人时机的把握和病人策略的选择，但究竟CTCs的比例或发生变化系数为多格外少时能够精确凸显SCLC的发作或转到由此可知不清楚，即可要格外多的循证医专修证据一再支持。

CTCs在分析SCLC病人病人不足之处的分析原理由此可知处于追寻收尾，病人现实生活中都CTCs比例的发生变化与SCLC病人发作的一致性及其与SCLC病人放疗时机的选择等疑虑在将来即可大量的医专修科专修界科专修界。近5年，对CTCs应该可作为SCLC病人肾功能所指标的科专修界逐渐升高，但SCLC最佳的肾功能CTCs并不一定系数由此可知不定论，争议颇多。

其中都3项来自Hou、Naito、Hiltermann的科专修界将SCLC的肾功能CTCs畀定系数分别的游戏为50、8和2个／7.5ml噬，差异很大，这可能不会与科专修界采用的统计专修原理不尽相同以及入组样本量较格外少有关。在在意大利专修者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病人连在一起科专修界，对终端期、l间隔发作后CTCs以及病人前后CTCs的发生变化系数分别的游戏肾功能并不一定系数，为将来的科专修界备有了取而代之思路。笔者所在的研究机构团队也正致力于无法不SCLC病人肾功能最佳CTCs并不一定系数的科专修界，结果令人盼望。

的有意识病人是病人方式而的发展斜向。SCLC病人对发作本品的质子化存在相对来说的个体差异，其主要状况可能不会与复杂的异质性、基因表达差异及相似性有关。所以，逐步严谨SCLC的遗传物质专修不同之处对发挥作用或许意义上的SCLC有意识病人尤为重要。在在无法不专修者王洁等科专修界人员通过分析原理单蛋白基因PCR目的对病人单个CTC透过以外遗传物质、外显子遗传物质PCR。

在此项科专修界中都，谢晓亮教授发明的多重退火和环化反应器的扩增高效率(MAIBAC)，急于发挥作用了对病人外周噬单个CTC的以外遗传物质扩增和深度PCR，在单个蛋白准确度探测以外遗传物质基因拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单蛋白准确度CTCs遗传物质PCR高效率可第一时间备有如青霉素基因型等有意识病人所即可的重要讯息，同时也为将来SCLC凋亡本品的技术开发备有高效率支持。

SCLC组织起来化石难以获取，限制了后续各项检查和科专修界的开展，而利用CTCs重构的SCLC反应器蛋白复刻病变( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望消除这一棘手难题。在在，Hodgkinson等尝试将6同上ED-SCLC病人lOml外周噬中都的CTCs提炼后注射到免疫细胞缺陷激素腹腔，结果在4只激素身上成型了CDXs，断言SCLC病人的CTCs具致病变性。

同时分析原理CelISearch依此样品这6同上SCLC病人的CTCs，整体而言急于成型CDXs的4同上病人的CTCs总和均>400个／7.5ml噬，而另外2同上未成型CDXs的病人其CTCs总和计有222和20个／7.5ml噬，指引SCLC的CTCs致病变性与外周噬CTCs教量有关。进一步分析挖掘出相较于发作危险性SCLC，发作青霉素性SCLC病人的CDXs大大减少星期细、发育格外不断。对3同上CDXs给予顺铂和依托泊苷发作本品，其危险性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病人的OS计有9.7.3.5.0.9个年底，指引对CDXs透过体外药敏试验中可以间接质子化病人生存星期。

该科专修界显示部分SCLC的外周噬CTCs具干蛋白适应性，可透过体外指导、成型与原发相对于相似的CDXs，为SCLC病人的体外药敏试验中、青霉素机制分析等一系列检查和科专修界备有了正因如此的组织起来，消除了SCLC病人化石比如说不足的疑虑。

推论

从现行的科专修界可以说明了，虽然CTCs在SCLC中都的医专修科专修界分析原理仍处于追寻收尾，但前景广阔。现有，诸多转变成性科专修界将要透过中都，相信随着科专修界的不断深入，CTCs有望成为SCLC的取得成功口，盼望CTCs在SCLC的领域中都为我们造就精采。

编辑： 雪